色譜柱可分為填充柱和開管柱。主要由金屬或玻璃制成。有直管、盤管、U管等形狀。液相色譜通常用于填充柱。色譜柱的分離效果取決于所選的固定相,以及色譜柱的制備和操作條件。
色譜是一種分離分析手段,分離是核心,所以分離的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。色譜柱的要求是柱效率高,選擇性好,分析速度快。市場(chǎng)上使用的各種HPLC顆粒填料,如多孔硅膠和以硅膠為基質(zhì)的鍵合相。氧化鋁。有機(jī)聚合物微球(包括離子交換樹脂)。多孔碳粒度一般為3.5.7.10μm,柱效理論值可達(dá)5~16萬/m。一般來說,分析只需要5000個(gè)塔板的柱效率;對(duì)于同一系列的分析,只需要500個(gè);對(duì)于難以分離的物質(zhì),可使用高達(dá)2000個(gè)柱。因此,大約10~30cm的柱長(zhǎng)可以滿足復(fù)雜混合物分析的需要。
柱效應(yīng)受柱內(nèi)外因素的影響。為了使色譜柱達(dá)到最佳效率,除了柱外死亡體積小外,還應(yīng)具有合理的柱結(jié)構(gòu)(盡量減少填充床外的死亡體積)和填充技術(shù)。即使是最好的填充技術(shù),柱中心和沿管壁的填充也總是不同的??拷鼙诘牟糠窒鄬?duì)松散,易于溝通,流量快,影響洗滌劑的流形,加寬光譜帶,即管壁效應(yīng)。管壁區(qū)域的厚度約為管壁的30倍。在一般的液相色譜系統(tǒng)中,柱效應(yīng)對(duì)柱效應(yīng)的影響遠(yuǎn)大于管壁效應(yīng)。
簡(jiǎn)單地說,色譜柱是色譜儀的分離單元。