HILIC色譜柱是用來改善反相色譜中保留強極性物質(zhì)較差的色譜技術(shù)。這種技術(shù)采用強極性的靜相材料，結(jié)合高比例的有機相和低比例的水相作為移動相來實現(xiàn)。這種移動相組成尤其有利于提高電噴霧離子化質(zhì)譜的敏感度。

HILIC柱的分離原理

目前對于分離機理仍存在一些爭議，主要涉及以下三個方面：

1. 分配機制

2. 離子交換

3.偶極-偶極相互作用。更多的實驗觀察結(jié)果顯示，HILIC色譜柱的樣品保留機理涉及氫鍵作用、偶極作用和靜電作用等多種附加效應(yīng)，這些效應(yīng)難以明確區(qū)分。

HILIC柱對于保留物質(zhì)的影響有哪些主要因素？

一般認為HILIC色譜柱的保留行為會受到多種因素的影響，包括固定相的功能團、有機改性劑含量、流速、柱溫、流動相的緩沖體系pH值、緩沖鹽種類和濃度。

固定相上保留行為的主要影響因素是流動相中有機溶劑的比例，比如增加乙腈含量會明顯提高保留因子。在HILIC色譜柱分離模式中，溶劑洗脫能力由弱到強的順序是：丙酮<乙腈<異丙醇<乙醇<甲醇<水，水是較強的洗脫劑。通常使用乙腈-水流動相，保持水的比例在5%-40%以發(fā)揮顯著的親水作用。若用甲醇、乙醇、異丙醇替代水相，流動相極性降低，待測物在柱上的保留也會增加。