C18色譜柱選擇的基本原則:
(1)烷基化處理封口填料的選擇可防止堿性化合物拖尾。
(2)選擇含碳量高的柱子,增加保留值。
(3)選擇較短的柱子。
(4)選用小顆粒填料。
(5)對(duì)分子量大的組分選用大孔徑填料柱。
C18色譜柱日常使用中的注意事項(xiàng):
(1)柱子裝卸更換時(shí),動(dòng)作要輕,接頭要適度擰緊。必須防止機(jī)械振動(dòng)強(qiáng)烈,以免柱床出現(xiàn)縫隙。
(2)如果儀器用于常規(guī)分析,樣品種類有限,但分析次數(shù)較多,不妨為每種常規(guī)分析配置一根專用柱,有助于延長柱的使用壽命。
(3)使用柱溫控制裝置時(shí),應(yīng)注意在進(jìn)入流動(dòng)后升溫。
(4)使用流動(dòng)相前應(yīng)進(jìn)行脫氣處理,以免降低柱效率和影響檢測。樣品溶液應(yīng)進(jìn)行適當(dāng)?shù)念A(yù)處理和過濾,以減少柱的污染和堵塞。
(5)更換流動(dòng)相類型時(shí),應(yīng)注意溶劑的互溶性,防止鹽析。
(6)柱的實(shí)際操作壓力應(yīng)低于填充時(shí)的較高壓力,低于高壓的一半。
(7)非極性鍵合相色譜柱,流動(dòng)相pH應(yīng)嚴(yán)格控制在一定范圍內(nèi),以免損壞柱子。
(8)分離分析工作完成后,不得立即停止,色譜分析系統(tǒng)應(yīng)及時(shí)清洗,以去除色譜柱中的雜質(zhì)。
(9)如果流動(dòng)相中有鹽,先用水充分清洗。如果在流動(dòng)相中加入胺,用甲醇和磷酸溶液混合溶劑沖洗,不要只用水沖洗。
(10)C甲醇通常用作保存溶劑,以防止柱干裂和損壞。嚴(yán)禁在色譜流路中長時(shí)間保留水或緩沖溶液。
(11)選擇合適的C18保護(hù)柱保護(hù)分析柱免受雜質(zhì)顆粒和不可逆吸附干擾物的影響。保護(hù)柱內(nèi)填料的粒度應(yīng)盡可能與分析柱填料的粒度一致。